Conceptes Clau en Microbiologia: Pirògens, Bacteris i Medis
Pirògens i Endotoxines: Definició i Importància
Els pirògens són qualsevol substància que produeix febre. Les endotoxines són substàncies que es retenen a la paret cel·lular i alliberen substàncies tòxiques perjudicials.
És crucial analitzar-les, ja que els medicaments han de ser estèrils i poden ser perjudicials per a la salut si contenen pirògens (causen febre) o endotoxines (que romanen al cos).
Classificació de Bacteris segons la Necessitat d'Oxigen
- Bacteris Aerobis: Necessiten oxigen per al seu creixement i reproducció. Moren en absència d'oxigen.
- Bacteris Anaerobis Facultatius: No necessiten oxigen per al seu creixement, però l'utilitzaran si està present.
- Bacteris Anaerobis Aerotolerants: No necessiten oxigen, ni els afecta ni l'utilitzen.
- Bacteris Anaerobis Estrictes: Moren quan es troben en contacte amb l'oxigen.
- Bacteris Anaerobis Microaeròfils: Requereixen baixes concentracions d'oxigen (aprox. 5%) i altes de CO2 per créixer, com els que es troben en els intestins humans.
Assajos Microbians Essencials en Medicaments
Per determinar la càrrega microbiana total en un medicament o forma farmacèutica, s'han de realitzar tres assajos principals, utilitzant el mètode de sembra per dilució en placa i proves específiques per a E. coli:
- Recompte Total de Microorganismes Aerobis (TAMC): Realitzat per sembra en profunditat en agar d'aigua de peptona (expressat en UFC/mL).
- Recompte Total Combinat de Llevats i Fongs (TYMC): Realitzat per sembra en profunditat (expressat en UFC/mL).
- Prova per a Microorganismes Específics: Prova de presència/absència d'E. coli en 1 g de mostra mitjançant inoculació directa (expressat en UFC/mL).
Medis de Cultiu: Tipus i Composició
Els medis de cultiu són conjunts de substàncies nutritives essencials per al creixement i la sembra de microorganismes.
Tipus de Medis segons la Consistència
Medis Líquids (Brous)
Són medis en estat líquid on els microorganismes creixen en suspensió i no formen colònies. Es preparen dissolent el preparat liofilitzat en calent i deixant refredar abans de la inoculació.
Medis Sòlids (Agar)
L'agar és un polisacàrid que prové d'algues marines i s'utilitza com a espessidor en aliments (gelatines, sopes, gelats) i en medis de cultiu. Fon aproximadament a la temperatura d'ebullició de l'aigua (uns 90 ºC) i es manté líquid fins a uns 45 ºC. Per evitar que solidifiqui abans del moment desitjat, es manté en un bany maria a uns 50 ºC.
Tipus de Medis segons la Composició
Medis Definits (Sintètics)
Són medis amb una composició química exactament coneguda, és a dir, se'n coneixen les quantitats precises de cada component. L'aigua de peptona n'és un exemple.
Medis Indefinits (Complexos)
Aquests medis no tenen una composició química definida, és a dir, no se'n coneix la quantitat exacta de cada component. Els extractes de carn o de llevat són exemples de medis indefinits.