Determinació de Coliformes: Mètodes, Microbioma i Metabolisme Bacterià
Determinació de Grups Coliformes: Indicadors de Qualitat
Mètodes d'Anàlisi de Coliformes Totals i Fecals
La determinació se centra en dos grups indicadors clau: els coliformes totals i els coliformes fecals.
Per dur a terme aquesta anàlisi, s’utilitzen principalment dos mètodes:
- El mètode de les dilucions successives i la valoració del Nombre Més Probable (NMP).
- El mètode de filtració per membrana.
El Nombre Més Probable (NMP): Tècnica Estadística
La valoració del Nombre Més Probable (NMP) és una tècnica de base estadística. Utilitzant taules numèriques que tenen en compte el volum d'aigua sembrada de la mostra i el nombre de tubs sembrats que presenten creixement bacterià, permet determinar el nombre més probable de bacteris d'un determinat grup indicador.
El Microbioma: Definició i Funció Essencial
El conjunt d’espècies de microorganismes associades a una espècie determinada constitueix un microbioma.
El Microbioma Humà i el seu Paper Protector
El microbioma humà està format per moltes espècies diferents que viuen en diverses parts del cos, incloent-hi:
- Els budells
- La pell
- La cavitat nasal, etc.
Moltes d'aquestes espècies produeixen nutrients i vitamines que ens són essencials (com és el cas de la vitamina K que ens aporta Escherichia coli).
Aquests microorganismes també tenen un paper protector de l’hoste, ja que ocupen un nínxol ecològic que evita la infecció per altres espècies que poden produir malalties. S’ha calculat que al cos humà hi ha deu vegades més cèl·lules de bacteris que cèl·lules humanes.
Característiques dels Coliformes Totals
El grup dels coliformes totals està format per:
- Bacils gramnegatius.
- Aerobis o anaerobis facultatius.
- Oxidasa negatius, que no formen espores.
- Bacteris que fermenten la lactosa amb producció d'àcid i gas a 37 °C en un temps màxim de 48 hores.
Són bacteris propis de la flora intestinal de l’home i dels animals, encara que també se’ls pot trobar en les aigües, el sòl i els vegetals com a resultat de la contaminació fecal. Tots els bacteris d'aquest grup formen part de la família Enterobacteriaceae.
Metabolisme dels Coliformes: Respiració i Fermentació
Oxidació de Sucres: Glucòlisi i Cicle de Krebs
La respiració i la fermentació de la lactosa per part dels bacteris del grup coliforme impliquen l'oxidació dels sucres. Aquesta oxidació és possible a través d'un conjunt de reaccions catalitzades per enzims que es donen a:
- La glucòlisi.
- El Cicle de Krebs (o cicle dels àcids tricarboxílics).
Tant a la glucòlisi com al cicle de Krebs s'alliberen protons i electrons d'alta energia que són capturats pels coenzims d’oxireducció per formar compostos reduïts:
- NAD+ (Nicotinamida Adenina Dinucleòtid) forma NADH.
- NADP+ (Nicotinamida Adenina Dinucleòtid Fosfat) forma NADPH.