Enginyeria Genètica i Tecnologia de l'ADN Recombinant

1. Enginyeria genètica

Enginyeria genètica: Conjunt de tècniques que permeten modificar l’ADN d’un organisme amb l’objectiu de canviar la informació que conté.

Organisme genèticament modificat (OGM): Organisme on el genoma ha estat alterat.

1.1 Tecnologia de l'ADN recombinant

Consisteix a aïllar un gen d’un organisme i inserir-lo en un de diferent. La finalitat és dotar un organisme d'una característica que abans no tenia. Per dur-la a terme es necessiten:

• Enzims de restricció: Tisores genètiques que tallen segments d’ADN.
• ADN ligases: Enzims que uneixen els segments d’ADN.
• Vectors de transferència: Plasmidis i virus que transporten l’ADN que es vol transferir a l’organisme receptor.
• Cèl·lules receptores: Reben el gen procedent d’un altre organisme.
• Organismes transgènics: Individus que han rebut el nou gen.

Tecnologia de l'ADN recombinant pas a pas:

• Localitzar i aïllar el gen que s’ha de transferir.
• Seleccionar un vector i tallar-lo amb els mateixos enzims de restricció amb què s’ha tallat l’ADN que s’ha de transferir per poder fer una unió de l’ADN elegit a l’ADN vector.
• Introduir l’ADN recombinant en la cèl·lula receptora.
• Comprovar que el gen introduït a l’organisme transgènic s’expressi.
• Multiplicació de l’organisme transgènic.

1.2 La PCR

La PCR és una tècnica que permet obtenir, en poques hores, milions de còpies d’un segment d’ADN. Consisteix a sotmetre el fragment d’ADN que es vol copiar a cicles successius d’escalfament i refredament en presència de l’enzim ADN polimerasa i de nucleòtids. Les aplicacions són molt variades.

La PCR pas a pas:

• El fragment d’ADN que s’ha de copiar s’escalfa per separar-ne els dos filaments.
• Els filaments separats es refreden i es tracten amb ADN polimerasa i nucleòtids per formar les cadenes complementàries de cada filament d’ADN.
• S’inicia un cicle nou on els fragments de partida són els dos fragments d’ADN formats durant el cicle.
• Després de 20 cicles s’aconsegueix disposar de més d’un milió de còpies.

1.3 Seqüenciació de l'ADN

Tècnica que permet determinar l’ordre de la seqüència de bases d’un determinat ADN. La seqüenciació d’ADN està automatitzada.