Identificació d’àcids en vi per cromatografia sobre paper

Fonament

Fonament: La cromatografia és, en general, una tècnica d’anàlisi que permet la separació de diverses substàncies d’una barreja líquida per poder-les determinar posteriorment. La cromatografia sobre paper és la més senzilla i la més accessible, i ens permet fer una determinació qualitativa de les substàncies que volem assajar. Utilitzarem la cromatografia sobre paper per separar els àcids que composen el vi degut a la seva diferent solubilitat.

Objectiu

1. OBJECTIU: Identificar els àcids presents en mostres alimentàries mitjançant la tècnica de cromatografia sobre paper.

Material i reactius

PROCEDIMENT:

Material − Fase estacionària: Paper de cromatografia Whatman nº 1.

• Eluent: Es preparen per separat les dissolucions següents i es barregen:
  • a) 120 mL de n-butanol amb 1 g/L de blau de bromofenol (revelador).
  • b) 60 mL d’àcid acètic al 50%.
• La dissolució s’introdueix a la càmera de cromatografia omplint només una alçada d’un centímetre i unes hores abans de fer la cromatografia per tal que la càmera es saturi dels vapors.
• Patrons: Es preparen dissolucions patró de diferents àcids del vi (àcid tartàric, àcid màlic, àcid làctic i àcid cítric) en una dissolució d’alcohol etílic al 10% (v/v) i a una concentració d’aproximadament 2 g/L.
• Mostres: diferents marques de vins.

Procediment

5.2. Procediment

Preparació de la placa

− Retallar un rectangle de paper de cromatografia Whatman nº 1 de dimensions 11 x 10 cm.

− Traceu la línia base, amb llapis, a 2 cm de l’extrem inferior i una línia superior, amb llapis, a 1 cm de l’extrem superior. Front de l’eluent.

− Feu una senyal a la línia base cada 1,5 cm. Seran els punts on dipositeu els patrons o mostres. Rotuleu a cada marca el nom del patró i mostra.

− Dipositeu patrons i mostres amb una micropipeta. El diàmetre de la gota sobre el paper no pot ser superior a 5 mm. Assequeu cada vegada que es dipositi la gota per tal d’evitar que les taques s’expandeixin massa i es solapin. Dipositeu un parell de cops cada patró o mostra.

− Col·loqueu la cromatoplaca a l’interior de la cubeta procurant no moure l’eluent. A partir d’aquest moment i fins que s’acabi l’elució, No moure la cubeta per res.

− Un cop arribat el front d’elució a la senyal marcada, treieu la cromatoplaca i assequeu-la.

− Deixeu penjada la cromatoplaca fins a veure les taques definides.