Medis de cultiu: tipus, preparació i aplicacions en microbiologia

Resum

El document explica què és un medi de cultiu i quins tipus existeixen segons la seva composició, l'estat físic i la finalitat (enriquiment, selectius i diferencials). També inclou substàncies addicionals com agents reductors, sistemes amortidors i indicadors de pH, i descriu el procediment de preparació d'un medi líquid.

Punts clau

Un medi de cultiu és un conjunt de substàncies nutritives preparades al laboratori per desenvolupar i multiplicar microorganismes.
Els medis poden ser definits (composició química coneguda) o complexos (com el brou nutritiu amb extracte de carn).
Segons l'estat físic, hi ha medis líquids o brous, sòlids (amb agent solidificant) i semi-sòlids o fluids.
Els medis d'enriquiment afavoreixen un tipus de microorganisme davant d'altres; els selectius inhibeixen certs grups; els diferencials mostren diferències en l'aspecte de les colònies.
Els agents reductors s'usen per cultivar anaerobis estrictes, i els sistemes amortidors mantenen el pH en el rang òptim.
La preparació d'un medi líquid implica dissoldre els components, escalfar, ajustar el pH, envasar, esterilitzar a l'autoclau i, si cal, desar a 4ºC.

Posa't a prova

Medis de Cultiu (M08)

Medi de cultiu: conjunt de substàncies nutritives (nutrients en suspensió d'aigua) preparades en el laboratori per a desenvolupar i multiplicar els microorganismes.

Cultiu microbià: conjunt de microorganismes que creixen i es multipliquen dins o sobre un medi de cultiu.

Medis definits

Els ingredients presenten una composició química perfectament establerta, com per exemple:

Glucosa 20g Aigua destil·lada 1000ml

Medis complexos

Brou nutritiu

Extracte de carn 5g

Aigua destil·lada 1000ml

Altres substàncies

Fluids corporals: plasma, sèrum sanguini, sang completa. S'afegeix als medis utilitzats en el cultiu de patògens.

Agents reductors: s'afegeixen per al cultiu d'anaerobis estrictes, ja que redueixen l'oxigen. Per exemple, la cisteïna i el tioglicolat.

Sistemes amortidors: són components que s'incorporen al medi de cultiu per mantenir el pH dintre del rang òptim del creixement bacterià. Ex: fosfats bisòdics o bipotàssics.

Indicadors de pH: s'afegeixen als medis de cultiu amb l'objectiu de detectar variacions de pH. Bacteris que fermenten lactosa i fan virar l'indicador Rojo neutro a vermell.

Medis segons l'estat físic

Medis líquids o brous: contenen només els nutrients dissolts en l'aigua.
Medis sòlids: contenen nutrients dissolts en l'aigua, a més d'un agent solidificant que dona rigidesa al medi. Els microorganismes són inoculats sobre la superfície d'aquests medis sòlids on creixen les colònies.
Medis semi-sòlids o fluids: contenen menor quantitat d'agent solidificant, donant lloc a una consistència gelatinosa. Utilitzats en estudis de mobilitat i hidròlisi de gelatina.

Medis de cultiu per aïllament i identificació

Medi d'enriquiment

És un medi que presenta una composició química que afavoreix el desenvolupament d'un tipus de microorganismes a càrrec d'altres que puguin ocupar el mateix hàbitat. Brou lactosat s'utilitza per afavorir el creixement de bacteris del gènere Salmonella a càrrec d'altres enterobacteris de la mateixa mostra.

Medi selectiu

Formats per compostos que inhibeixen el creixement de determinats grups de microorganismes i toleren el desenvolupament d'altres.

Medis diferencials o cromogènics

Aquests medis porten nutrients, colorants, o indicadors de pH que donaran lloc a diferents aspectes colonials segons el tipus de microorganismes que creixi. Colònies de Salmonella en agar BGA són de color rosa transparent, amb un halo vermell, en canvi E. coli formen bacteris groc-verdoses.

Preparació: Medis líquids en ampolla o tub

Dissoldre els components en aigua destil·lada (volum mesurat amb proveta).
Escalfar per homogeneïtzar.
Ajustar el pH.
Posar a l'ampolla o als tubs i tapar amb taps de PVC, metàl·lics o cotó gras i esterilitzar a l'autoclau.
Quan la T és l'ambiental, ja es poden utilitzar. Sinó es desa a 4ºC.

Preguntes freqüents

Què és un medi de cultiu?

Un medi de cultiu és un conjunt de substàncies nutritives (nutrients en suspensió d'aigua) preparades en el laboratori per desenvolupar i multiplicar microorganismes.

Quina diferència hi ha entre un medi selectiu i un de diferencial?

Un medi selectiu conté compostos que inhibeixen el creixement de determinats grups de microorganismes i toleren altres. Un medi diferencial porta nutrients, colorants o indicadors de pH que fan que les colònies tinguin aspectes diferents segons el microorganisme.

Per a què s'utilitzen els agents reductors en un medi de cultiu?

S'afegeixen per al cultiu d'anaerobis estrictes, ja que redueixen l'oxigen. Per exemple, la cisteïna i el tioglicolat.